浙江省首例！精准定位致病基因所在染色体 神奇的“三代测序”宝宝出生

“金医生，我们宝宝出生啦！是一个大胖小子。非常健康！”近日，浙江大学医学院附属邵逸夫医院（以下简称“浙大邵逸夫医院”）遗传咨询门诊的金佳敏医生收到了来自小林（化名）的喜报。

这个在浙大邵逸夫医院产科健康出生的新生儿，是全省首例应用三代测序技术的试管婴儿宝宝，标志着浙江省应用三代测序技术的单基因病胚胎植入前遗传学诊断（PGT-M）试管婴儿临床应用跨入了新时代。

夫妻结婚多年不育

原来是因为基因突变

去年3月，小林的丈夫小张（化名）因多年不育，加上多次外院检查提示少精子症，慕名来到浙大邵逸夫医院男性不育与辅助生殖门诊求助蒋凌英副主任医师。

就诊过程中，蒋凌英发现小张的生殖器偏短小，进一步追问病史后，得知他青少年时期曾因尿道下裂做了手术。进一步进行生化检查，发现其促卵泡激素（FSH）和黄体生成素（LH）水平都比正常男性要高2倍以上，而睾酮却比正常男性低。

蒋凌英敏锐地觉察到小张可能是由遗传因素导致的性发育异常（DSD），便将他转到了遗传咨询门诊。“首先对小张进行外周血染色体核型检查，结果提示为正常的男性染色体核型（46，XY）。于是，我们推测男方可能是基因突变导致的性腺发育异常。当即就给他安排了外周血全外显子组基因测序。结果提示患者携带NR5A1基因的致病变异。”接诊的金佳敏医生说。

据悉，NR5A1是性腺发育相关基因，该基因异常主要导致的临床表现为性发育畸形，伴随卵巢或睾丸的功能不全，生育能力下降，而小张与NR5A1关联疾病的临床表型高度吻合。

孩子有50%的概率携带致病基因

PGT-M技术筛选可实现优生优育

金佳敏解释：“这种病通常表现为常染色体显性遗传模式，患者生育的孩子有50%的概率会携带这种致病基因，导致性发育异常。另外，小张还存在严重的少精子症。所以，我们建议他们选择PGT-M技术来实现优生优育。”

但事情并没有计划得这么顺利。在进行家系验证时发现，小张的突变是新发突变，也就是说他父母的基因是正常的，并没有突变。这就意味着，无法确定致病基因突变所在的染色体单体型，难以对最后的胚胎进行致病基因携带情况的分析。

值得庆幸的是，在该院生殖医学中心张松英教授的带领下，通过团队反复讨论和前期实验，最终，采用了目前国际最新技术——单分子三代测序技术帮小张夫妇精准定位了致病基因所在的染色体，构建了单体型。

夫妇俩在生殖医学专科团队的通力协作下顺利完成促排卵、取卵，获成熟卵8枚，并成功培养出5枚囊胚，通过对囊胚滋养外胚层细胞进行活检后再进行PGT-M检测，最终发现有3枚胚胎染色体数目正常，其中仅有1枚胚胎不携带致病基因突变，可用于移植。

去年11月，夫妇俩顺利移植了这枚珍贵的囊胚并成功受孕，孕中期羊水检测显示胎儿不携带男方的致病变异。最终，小林成功诞下一名健康男婴。

张松英指出，第三代测序技术具有独特的优势：首先，第三代测序技术是无需PCR扩增（聚合酶链式反应），实现了对每一条DNA分子的单独测序，也就是单分子测序技术；其次，通过三代单分子纳米孔测序技术平台，可以做到单分子超长读长测序，解决单基因病患者和染色体病患者家系的新发突变、家系样本不全、家系样本采集困难的PGT检测难题；最后，第三代测序技术仅需夫妻双方血样即可，无需再采集其他家系成员样本，可满足新发突变患者或家系样本不全家庭的检测需求，通过长读长测序对致病变异携带者一方直接构建单体型。

目前，浙大邵逸夫医院生殖医学中心已成功开展数十例三代测序PGT-M，其中多数已成功受孕，且羊水穿刺检测提示正常。这一技术的运用，有望精准帮助更多家庭实现优生优育之梦。